1961 in Plauen geboren, nahm während seiner Schulzeit Gesangsunterricht, lernte Gitarre und Flöte, sang in Chören und spielte in Laientheatern. Von 1983-1987 studierte er an der Hochschule für Schauspielkunst Ernst Busch in Berlin, spielte während seines Studiums bereits am Maxim-Gorki-Theater in Berlin und war anschließend am Kleist-Theater in Frankfurt/Oder engagiert.

Einem größeren Publikum wurde Matthias Freihof durch den Film „Coming Out“ bekannt, für den er 1990 den Darstellerpreis erhielt – der Film  wurde mit dem silbernen Bären ausgezeichnet und Freihof selbst wurde liebevoll zum James Dean des Ostens gekürt. Nach der Wende etablierte sich Matthias Freihof im Fernsehen durch Mitwirkung in Serien wie z.B. „Die Männer vom K3“, „Für alle Fälle Stefanie“, „Autobahnpolizei“, „Marienhof“ u.a.

Von 1998-2003 spielte er in der Krimiserie „Siska“ eine der Hauptfiguren, den Komissar Lorenz Wiegand. Daneben drehte er unter der Regie von Hark Bohm den Dreiteiler „Vera Brühne“, sowie Episodenrollen in „Stubbe“ und „SOKO“.

Er lebt in Berlin.